一、儀器校準與準備

1. 校準儀器：
   • 開啟儀器，檢查溫度、壓力、濕度等參數是否正常。
   • 使用標準菌株或校準工具驗證菌落計數功能，確保儀器顯示精度符合要求。
2. 試劑與樣品準備：
   • 準備無菌生理鹽水、培養基（如營養瓊脂）、無菌棉拭子等。
   • 樣品需進行無菌處理，若為液體需控制顆粒雜質（如離心或過濾）。

二、樣品處理與加載

1. 無菌操作：
   • 在潔凈臺或無菌室內操作，避免環境微生物污染。
   • 固體樣品用無菌棉拭子擦拭表面，液體樣品直接抽濾。
2. 加載樣品：
   • 將樣品注入濾杯，注意液體高度不超過刻度線。
   • 啟動真空泵，使樣品通過濾膜，微生物被截留在膜上。

三、濾膜轉移與培養

1. 轉移濾膜：
   • 用無菌鑷子取出濾膜，菌面朝上貼于培養基表面，避免氣泡。
   • 封閉培養皿，標記樣品信息。
2. 恒溫培養：
   • 將培養皿置于恒溫培養箱，根據微生物類型設定溫度（如37℃）和時間（24-48小時）。
   • 培養期間每日觀察菌落生長情況。

四、菌落計數與分析

1. 計數規則：
   • 培養結束后，統計濾膜上的菌落數，按公式換算為樣品中的微生物含量。
   • 區分細菌、霉菌、酵母菌，記錄形態學特征。
2. 結果分析：
   • 對比標準限值（如藥典規定），判斷樣品是否合格。
   • 異常結果需復檢或結合其他方法驗證。

五、清潔與維護

1. 儀器清潔：
   • 使用75%酒精擦拭儀器表面，濾杯、硅膠管用蒸餾水沖洗后晾干。
   • 真空泵定期更換機油，保持管路暢通。
2. 耗材管理：
   • 濾膜、密封圈等耗材需干燥保存，避免污染。
   • 定期校準儀器，記錄維護日志。

總結：微生物限度儀通過“校準-抽濾-培養-計數-維護”的閉環流程，為藥品、食品等領域提供高效的微生物污染檢測方案。標準化操作結合嚴格質控，是保障產品質量與安全的關鍵環節。